GMP级干细胞冻存液 Stem-Cellbanker GMP grade 11897 20ml /11890 100ml CELLOTION 11898

产品描述：

STEM-CELLBANKER ®是GMP下生产的ES细胞和iPS细胞冻存液 产品特点是化学成分清晰，无动物源成分，专门针对ES细胞和iPS细胞特点设计的细胞冻存液。STEM-CELLBANKER ®是*无血清和动物源性成分的，所有成分*欧洲药典或美国药典的要求，是干细胞治疗和应用合适的细胞冻存液，STEM-CELLBANKER ®使用方便，不需要特殊设备和仪器就可以实现干细胞高存活率的冻存和长达10年以上的长期保存。

STEM-CELLBANKER ®还显著增加细胞活力，同时保持细胞多能性，和细胞的正常核型和增殖能力，是一般冻存液无法达到的。

产品特点：

1）化学成分清楚和无动物源成分

2）按照日本，欧盟，美国和PIC/SGMP指南生产

3）复苏后保持细胞的高活力

4）解冻复苏后依然保持干细胞的多能性

5）实现细胞的长期冻存，不管是-80度还是液氮保存都可以保证活性10年以上

6）可以不需要液氮就可以长期保存

7）同样可以适合组织冷冻保存及其他珍贵细胞冻存

8）STEM-CELLBANKER 已经得到美国食品药物管理局的认证（生物制品评价和研究中心）

STEM-CELLBANKER ®是*无血清和动物源性成分的，所有成分*欧洲药典或美国药典的要求，是干细胞治疗和应用合适的细胞冻存液，STEM-CELLBANKER ®使用方便，不需要特殊设备和仪器就可以实现干细胞高存活率的冻存和长达10年以上的长期保存。

STEM-CELLBANKER ®还显著增加细胞活力，同时保持细胞多能性，和细胞的正常核型和增殖能力，是一般冻存液无法达到的。

应用实例：

图1 STEM-CELLBANKER对人体胚胎干细胞（hESC） 和诱导多能（iPS）干细胞进行冻存测试

测试冻存液：STEM-CELLBANKER冻存液 vs 常规细胞冻存液（细胞培养基 + 10% DMSO + 血清代替品）

细胞存活率评估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit试剂盒

测试结果：使用STEM-CELLBANKER冻存液的细胞存活率明显提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分别高达９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常规细胞冻存液高一倍。同时，结果也显示STEM-CELLBANKER冻存液没有给细胞的增殖、分化和染色体组形带来影响。

图2.将小鼠肾脏切碎成约5平方毫米。将组织样品或者立即固定用10％福尔马林或冷冻保存与在-801毫升STEM-CELLBANKER的ø C一周。冷冻保存的样品在解冻后立即用10％福尔马林固定。两种样品的石蜡切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗体染色。在新鲜和冷冻保存的组织样品中，坏死或细胞凋亡的迹象都可以忽略不计。在来自各种小鼠器官的组织样品的情况下获得了类似的结果。

图3.总RNA从小鼠肺成纤维细胞系的任收获后立即或在-80与STEM-CELLBANKER冻存后的细胞中提取ø C一周和解冻。通过DNA微阵列分析比较两个样品中的mRNA水平，结果显示93％的mRNA在±1.6倍差异的范围内。

细胞株：129SV (Mouse ES cell)

测试冻存液：ZENOAQ 产品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）

常规自培冻存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程图：

使用手册:

细胞冷冻保存方法

选择冻存处于对数生长数的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

1. 按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。

2. 按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。

（参考：5×10⁵ 至 5×10⁶ cells/ml）。

3. 取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞(参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去离心管中的上清液。

4. 加入适量的CELLBANKERⓇ 细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为 5×105 至 5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。

5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标示*的冷冻保存管中。

6. 直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。

7. 若研究者需要液氮保存时，可将*冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。

冻存细胞复苏方法：

1. 从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃ 振动水浴槽中快速解冻。

2. 待冻存管中细胞混合液*融化后，立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中，混合均匀。

3. 离心收集培养细胞((参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4. 清洗细胞，充分洗净残留冻存液。

5. 加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。

6. 镜检后，研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。

储存方法和保质期

储存于４℃以下。 保质期３年。3个月以上没有使用CELLBANKER冻存液的计划时，尽可冷冻保存。为避免重复冻结-解冻过程可能导致的CELLBANKER品质下降和性能降低，推荐将 100mL 产品分装小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱冻存。

质量