| 别称
HSN2; KDP; PHA2C; PRKWNK1; HSAN2; Protein Kinase,Lysine Deficient 1; Hereditary Sensory Neuropathy, Type II; Erythrocyte 65 kDa protein; Kinase deficient protein
| Wnk1 简介
赖氨酸缺乏蛋白激酶 1(Wnk1)是一种由 WNK1 基因编码的酶。它由 2382 个氨基酸组成(分子量 230kDa)。该蛋白含有一个位于其短的 N 端域和长的C 端尾部的激酶结构。该激酶结构与MEKK 蛋白激酶家族有一些相似之处。作为 WNK 家族的一员,该激酶的催化赖氨酸残基独特地位于甘氨酸环的β 链 2。为了具有激酶活性,它必须对其激活环中的丝氨酸 382 残基进行自动磷酸化。此外,在另一个部位(丝氨酸 378)的磷酸化会增加 WNK1 的活性。一个自抑制结构域位于C 端结构域内,同时还有一个HQ 结构域,这是WNK1 与其他 WNKs 相互作用所需要的。WNKs 之间的相互作用在功能上起着重要作用;缺乏 HQ 结构域的 WNK1 突变体也缺乏激酶活性。
| 特异性
可检测样本中小鼠的Wnk1,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| 浓度(ng/mL) | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.312 | 0.156 | 0 |
| OD值 | 2.22 | 1.56 | 0.92 | 0.63 | 0.42 | 0.25 | 0.18 | 0.08 |
| 校正OD值 | 2.14 | 1.48 | 0.94 | 0.55 | 0.34 | 0.17 | 0.1 | - |
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的小鼠Wnk1,计算回收率
| 样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
| 血清(n=8) | 84-101 | 96 |
| 血浆(n=8) | 92-106 | 103 |
| 细胞培养上清(n=8) | 96-108 | 105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度小鼠Wnk1,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
| 稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
| 1:2 | 范围(%) | 84-96 | 88-96 | 90-110 |
| 平均回收率(%) | 92 | 93 | 96 | |
| 1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-115 |
| 平均回收率(%) | 94 | 98 | 108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。



